En autoklav är mer eller mindre lik en tryckkokare, förutom att autoklaven rör sig mer vaksamt. Detta förklaras av oro för att verktygen inte innehåller några mikroorganismer, så det finns lite utrymme för fel vid sterilisering. Autoklaven har ett huvudfack där utrustningen som ska steriliseras placeras. Efter detta stängdes kammaren och enheten slogs på för att rikta det täta ångmolnet in i facket. Under denna process börjar temperaturen och trycket i kammaren att öka i syfte att nå och bibehålla en temperatur på cirka 120 grader Celsius.
Men skulle ångan tryckas in i kammarrengöringsanordningen så här? Vad händer med döda mikrober? En autoklav är mer avancerad eftersom den innehåller rör och ventiler som tillåter utbyte av luft inuti. Dessa rör tillåter ren ånga att komma in i kammaren och trycka ut förorenad luft ur kammaren. En typisk steriliseringsprocess kräver cirka 15 minuters ånga vid 120 grader Celsius, men observera att detta inte är standard eftersom det beror på vilken typ av utrustning som steriliseras. Vissa kombinationer görs med extra het ånga, vilket gör att materialet kan steriliseras på kortare tid. Extremt höga temperaturer förstör mikrobernas inre och eliminerar därmed alla chanser att överleva. Efter steriliseringsperioden avlägsnas ångan och trycket minskas gradvis. Effektiv sterilisering beror på användningen av mättad ånga för att tränga undan förorenad luft, så exponering för denna rena ånga säkerställer effektiv sterilisering.